הנושאים שמעניינים אותי
(אפשר לבחור מספר נושאים)
ציטומטרית זרימה – FACS
ציטומטריית זרימה – Flow cytometry, מאפשרת לאסוף מידע חלבוני רב ברמת התא הבודד. בשנים האחרונות ציטומטריית הזרימה ממירה שיטות מסורתיות שאיפשרו לאפיין אוכלוסיות תאים מעורבת (למשל מדידת כמות חלבון ב Western blot) ומאפשרת לשאול שאלות ולקבל תשובות ברמת התא הבודד תוך בחינה של פרמטרים חלבוניים רבים. מטרת הקורס היא לשפר את יכולותינו בשימוש מושכל, נכון ויעיל בטכנולוגיה של ציטומטריית הזרימה...המשך קריאה
יש לך שאלה? יש לנו את כל התשובות
מה תכני הקורס?
- עקרונות הFACS
- כיצד בנוי המכשיר, כיצד נאסף המידע?
- תכונות אופטיות של תאים, אוטופלורוסנציה, גודל (FSC) וגרנולריות (SSC) של תאים
- שטח גובה ואורך של ה Forward scatter – FSC וכיצד נתונים אלו עוזרים לנו להבחין בתאים כפולים
- צבענים פלואורסנטיים – מונחים בסיסיים. התאמה של צבענים לסמנים (מרקרים) תאיים. איך משלבים צביעה ל 2, 3 ואפילו 18 סמנים שונים באותו פאנל?
- יתרונות ה multicolor flow cytometry על פני צביעה לסמן אחד או שניים
- עבודה עם דגימות ביולוגיות וקריאה נכונה ב FACS
- דם מול רקמה, התמודדות שונה
- צביעה חוץ תאית לעומת צביעה תוך תאית, האם ניתן לשלב בין השתיים?
- שיטות צביעה לחיות תאים – יתרונות הצבענים הצובעים שיירים אמיניים. למה צביעה לחיות הינה חיונית בניסויים פונקציונליים (למשל בניסויים הבודקים שחרור ציטוקינים)
- יצירה של ערוץ DUMP האוסף תאים מתים ותאים שאינם רצויים בניסוי
- כמה תאים יש לאסוף?
- שימוש ב- compensation beads ליצירת מטריצה של קומפנסציה
- מה זה fluorescence spillover וכיצד הקומפנסציה מתקנת אותו?
- איך בונים מטריצת קומפנסציה אוטומטית ב DIVA או ב FLOWJO
- איך מזהים קומפנסציה לקויה, ומה עושים על מנת לתקן אותה ידנית
- מה הוא Spreading error ומדוע הקומפנסציה לעולם לא תתקן אותו? מה כן ניתן לעשות כדי לטפל ב – Spreading error.
- מה זה טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית וכיצד היא מסיעת בהצגה טובה יותר של התוצאות
- שיטות למדידת כמות DNA ופרוליפרציה של התאים
- שיטות למדידת שחרור ציטוקינים על ידי תאים – כיצד להיזהר מארטיפקטים?
- שימור/פיקסציה של התאים בתום הצביעה
- טיפים לצביעה ולאנליזה נכונה של התאים
- אנליזה ומטה-אנליזה של התוצאות
- Hierarchical gating כיצד מבצעים גייטינג נכון של דגימת ה FACS?
- Singlet gating
- Live cell gating
- Backgating
- Cell subset gating
- שימוש בביקורת ביולוגית, לעומת FMO, לעומת Isotype control
- דוגמא מסכמת – ניתוח פוליפונקציונליות polyfunctionality של תאי T
- תכנון פאנלים גדולים ושימוש במטריצה של spreading error לבחירת צבענים
- סורטינג לתאים – עקרונות בסיסיים
- מטה אנליזה בעזרת תוכנות ייעודיות
למי זה מתאים?
- אנשי התעשייה הביוטכנולוגית ותעשיית התרופות
- חוקרים במכוני מחקר ואוניברסיטאות
- אנשי שיווק מתחום ה FACS
- עובדי מעבדה במרכזים רפואיים ובתי חולים
מה אקבל מכך בפועל?
- הבנת עקרונות הפעולה של ה FACS
- הכרת ה Multi-color flow cytometry ויתרונות השימוש בו
- לימוד של כלים וכללים חשובים לצביעה, לשימור (פיקסציה), ולקריאה נכונה של תאים ב FACS
- הכרת מושגים ושימוש בהם:
- staining index
- קומפנסציה
- מטריצת לקומפנסציה
- ערוץ DUMP
- Spreading error
- טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית
- אנליזה נכונה ב FACS
- איך נפטרים מתאים מתים, מתאים כפולים (doublets) ומארטיפקטים נפוצים
- תכנון נכון של ניסויים ב FACS וביצוע של מטה אנליזה לתוצאות
מי מעביר את הקורס?
4 תגובות ל- "ציטומטרית זרימה – FACS"
שלום רב,
אני מעוניינת בקורס של FACS. ראיתי עכשיו שהוא התחיל היום.
האם ניתן לשלם עבור הקלטות של הקורס? מתי המועד הבא של הקורס מתקיים?
תודה רבה
מילה שלום,
תודה על פנייתך והתעניינותך בקורס FACS.
נשיב לך ישירות לאימייל עם פרטים לגבי קורס זה.
בברכה, צוות ביופורום
חוזרים על הקורס ב2021?
חוליאן שלום, תודה על פנייתך.
נשמח לעדכן אותך כשייקבעו לקורס זה תאריכים פתיחה חדשים, בשאיפה עוד השנה (2021).
בברכה,
צוות ביופורום