הנושאים שמעניינים אותי
(אפשר לבחור מספר נושאים)
ציטומטרית זרימה – FACS
ציטומטריית זרימה (Flow cytometry) מאפשרת לאסוף מידע רב ברמת התא הבודד באופן שמאפשר לאתר שינויים מזעריים ברמות ביטוי של מולקולות ביולוגיות בתאים הנחקרים. בשנים האחרונות ציטומטריית הזרימה ממירה יותר ויותר שאלות שנשאלו ברמת אוכלוסיות התאים המעורבת (למשל מדידת כמות חלבון ב western blot) לשאלות שנשאלות ברמת התא הבודד. למרות שמעבדות רבות משתמשות בציטומטריית זרימה למגוון מצומצם של בדיקות, שימוש נכון...המשך קריאה
יש לך שאלה? יש לנו את כל התשובות
מה תכני הקורס?
- עקרונות ה-FACS
- כיצד בנוי המכשיר, כיצד נאסף המידע?
- תכונות אופטיות של תאים, אוטופלורוסנציה, גודל (FSC) וגרנולריות (SSC) של תאים
- שטח גובה ואורך של ה Forward scatter – FSC וכיצד נתונים אלו עוזרים לנו להבחין בתאים כפולים
- צבענים פלואורסנטיים – מונחים בסיסיים. התאמה של צבענים לסמנים (מרקרים) תאיים. איך משלבים צביעה ל 2, 3 ואפילו 10 סמנים שונים באותו פאנל?
- יתרונות ה multicolor flow cytometry על פני צביעה לסמן אחד או שניים
- עבודה עם דגימות ביולוגיות וקריאה נכונה ב FACS
- דם מול רקמה, התמודדות שונה
- צביעה חוץ תאית לעומת צביעה תוך תאית, האם ניתן לשלב בין השתיים?
- שיטות צביעה לחיות תאים – יתרונות הצבענים המולקולריים הצובעים שיירים אמיניים. למה צביעה לחיות הינה חיונית בניסויים פונקציונליים (למשל בניסויים הבודקים שחרור ציטוקינים)
- יצירה של ערוץ DUMP האוסף תאים מתים ותאים שאינם רצויים בניסוי
- כמה תאים יש לאסוף?
- שימוש ב- compensation beads ליצירת מטריצה של קומפנסציה
- מה זה fluorescence spillover וכיצד הקומפנסציה מתקנת אותו?
- איך בונים מטריצת קומפנסציה אוטומטית ב DIVA או ב FLOWJO
- איך מזהים קומפנסציה לקויה, ומה עושים על מנת לתקן אותה ידנית
- מה זה Spreading error ומדוע הקומפנסציה לא מתקנת אותו?
- מה זה טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית וכיצד היא מסיעת בהצגה טובה יותר של התוצאות
- שיטות למדידת כמות DNA ופרוליפרציה של התאים
- שיטות למדידת שחרור ציטוקינים על ידי תאים – כיצד להיזהר מארטיפקטים?
- שימור/פיקסציה של התאים בתום הצביעה
- טיפים לצביעה ולאנליזה נכונה של התאים
- אנליזה ומטה-אנליזה של התוצאות
- Hierarchical gating – כיצד מבצעים גייטינג נכון של דגימת ה FACS?
- Singlet gating
- Live cell gating
- Backgating
- Cell subset gating
- שימוש בביקורת ביולוגית, לעומת FMO, לעומת Isotype control
- דוגמא מסכמת – ניתוח פוליפונקציונליות (polyfunctionality של תאי T)
- סורטינג לתאים – עקרונות בסיסיים
- מטה אנליזה בעזרת תוכנות ייעודיות
למי זה מתאים?
- אנשי התעשייה הביוטכנולוגית ותעשיית התרופות
- חוקרים במכוני מחקר ואוניברסיטאות
- אנשי שיווק מתחום ה FACS
- עובדי מעבדה במרכזים רפואיים ובתי חולים
מה אקבל מכך בפועל?
- הבנת עקרונות הפעולה של ה FACS
- הכרת ה Multi-color flow cytometry ויתרונות השימוש בו
- לימוד של כלים וכללים חשובים לצביעה, לשימור (פיקסציה), ולקריאה נכונה של תאים ב FACS
- הכרת מושגים ושימוש בהם:
- staining index
- קומפנסציה
- מטריצת לקומפנסציה
- ערוץ – DUMP
- Spreading error
- טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית
- אנליזה נכונה ב FACS
- איך נפטרים מתאים מתים, מתאים כפולים (doublets) ומארטיפקטים נפוצים
- רכישת כלים לתכנון נכון של ניסויים ב FACS ולביצוע של מטה אנליזה לתוצאות
מי מעביר את הקורס?
4 תגובות ל- "ציטומטרית זרימה – FACS"
שלום רב,
אני מעוניינת בקורס של FACS. ראיתי עכשיו שהוא התחיל היום.
האם ניתן לשלם עבור הקלטות של הקורס? מתי המועד הבא של הקורס מתקיים?
תודה רבה
מילה שלום,
תודה על פנייתך והתעניינותך בקורס FACS.
נשיב לך ישירות לאימייל עם פרטים לגבי קורס זה.
בברכה, צוות ביופורום
חוזרים על הקורס ב2021?
חוליאן שלום, תודה על פנייתך.
נשמח לעדכן אותך כשייקבעו לקורס זה תאריכים פתיחה חדשים, בשאיפה עוד השנה (2021).
בברכה,
צוות ביופורום