במהלך הקורס ידונו הפונקציות הבסיסיות של הכרומטוגרפיה ויישומן המעשי
בעבודה היום-יומית, לימוד המכשור הקיים וגם המודרני, כולל איתור והתמודדות
עם תקלות, פרמטרים של שיטות ההפרדה כולל ולידציה.
יושם דגש על הבנת הכימיה של הכרומטוגרפיה לצורך פיתוח שיטות חדשות וכן הבנה ושיפור שיטות קיימות.
במהלך הקורס תהיה אפשרות להתייחסות לסוגיות כרומטוגרפיות ספציפיות שיועלו על ידי המשתמשים.
- מבוא לכרומטוגרפיה
- התיאוריה (רקע, מושגים, נוסחאות בסיסיות - על מנת לוודא שכולם "מדברים באותה שפה")
- פונקציית ואן דמיטיר - יישום בעבודה יומית תוך התייחסות למכשור מודרני
- כרומטוגרפיה נוזלית בלחץ גבוה – HPLC
- הגדרות בכרומטוגרפיה נוזלית +, סוגי הכרומטוגרפיה הנוזלית כולל UHPLC
- פירוט חלקי מכשיר –HPLC (משאבות, יחידות הזרקה, גלאים וכו') כולל השוואה ל- UHPLC
- קולונות + שיטות הפרדה
- קולונות ב-HPLC
- תנאי הרצה (טמפ', pH, זרימות, לחצים וכו') + הכנת דוגמאות כולל SPE
- בחירת הפאזה הנחה (הפוכה, ישרה, HILIC, GPC), בחירת הממסים, בחירת פרופילי גרדיאנט, אינדיקציות ואינטרפטציות
- פיתוח שיטות הפרדה ב-HPLC וב-UHPLC
- שיטות אינטגרציה ואנליזה כמותית
- הדגמה של שיטות אינטגרציה והפעלתן בצורה נכונה
- אנליזה כמותית – לימוד סוגי האנליזות הכמותיות וישומן צעד אחר צעד כולל חישובים
- וולידציה של שיטות
- הרכב תהליך הולידציה, דרישות, חישובים, LOD, LOQ, % השבה, לינאריות, הדירות, אי-וודאות
- תקלות ופתרונן
- איתור תקלות נפוצות ב- HPLC ופתרונן
- HPLC פרפרטיבי
- מעבר מ-HPLC אנליטי לפרפרטיבי, גימלון, טכניקות לקבלת מרכיבים מבודדים מתערובות ממטריצות פשוטות ומורכבות
- LCMS
- עקרונות + סוגים של מכשור נפוץ ומודרני
- טכניקות עיבוד נתונים, יישום טכניקת רזולוציה גבוהה בפיענוח מבנה מולקולות
- ניתוח תוצאות כולל תרגול בכיתה
- דוגמאות