ציטומטרית זרימה
FACS


תאריך: יפורסם בהמשך
מיקום הקורס: כפר המכביה, רמת גן
מידע כללי
משך הפעילות: 2 ימי לימודים מלאים
שעות: 9:00-17:00
עלות: 3,500 ש"ח+מע"מ
נקודות זכות: 2
מק''ט: 18620
שפת הקורס: עברית
על הקורס
ציטומטריית זרימה (Flow cytometry) מאפשרת לאסוף מידע רב ברמת התא הבודד באופן שמאפשר לאתר שינויים מזעריים ברמות ביטוי של מולקולות ביולוגיות בתאים הנחקרים. בשנים האחרונות ציטומטריית הזרימה ממירה יותר ויותר שאלות שנשאלו ברמת אוכלוסיות התאים המעורבת (למשל מדידת כמות חלבון ב- western blot) לשאלות שנשאלות ברמת התא הבודד. למרות שמעבדות רבות משתמשות בציטומטריית זרימה למגוון מצומצם של בדיקות, שימוש נכון במכשיר מאפשר לענות בצורה מדויקת יותר על מגוון רחב יותר של שאלות מדעיות וקליניות.
קהל היעד
  • אנשי התעשייה הביוטכנולוגית ותעשיית התרופות
  • חוקרים במכוני מחקר ואוניברסיטאות
  • אנשי שיווק מתחום ה-FACS
  • עובדי מעבדה במרכזים רפואיים ובתי חולים
ציטומטרית זרימה
FACS
התועלת שתופק
  • הבנת עקרונות הפעולה של ה-FACS
  • הכרת ה- Multi-color flow cytometry ויתרונות השימוש בו
  • לימוד של כלים וכללים חשובים לצביעה, לשימור (פיקסציה), ולקריאה נכונה של תאים ב-FACS
  • הכרת מושגים ושימוש בהם: staining index, קומפנסציה, מטריצת לקומפנסציה, ערוץ - DUMP,Spreading error, טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית ועוד
  • אנליזה נכונה ב-FACS – איך נפטרים מתאים מתים, מתאים כפולים (doublets) ומארטיפקטים נפוצים
  • רכישת כלים לתכנון נכון של ניסויים ב-FACS ולביצוע של מטה אנליזה לתוצאות
השאר פרטים למידע נוסף
  • שם מלא
  • דוא''ל
  • טלפון
  • הערות
  • שלח
תכני הקורס

  • עקרונות ה-FACS
    • כיצד בנוי המכשיר, כיצד נאסף המידע?
    • תכונות אופטיות של תאים, אוטופלורוסנציה, גודל (FSC) וגרנולריות (SSC) של תאים
    • שטח גובה ואורך של ה-Forward scatter - FSC וכיצד נתונים אלו עוזרים לנו להבחין בתאים כפולים
    • צבענים פלואורסנטיים – מונחים בסיסיים. התאמה של צבענים לסמנים (מרקרים) תאיים. איך משלבים צביעה ל- 2, 3 ואפילו 10 סמנים שונים באותו פאנל?
    • יתרונות ה- multicolor flow cytometry על פני צביעה לסמן אחד או שניים
  • עבודה עם דגימות ביולוגיות וקריאה נכונה ב-FACS
    • דם מול רקמה, התמודדות שונה
    • צביעה חוץ תאית לעומת צביעה תוך תאית, האם ניתן לשלב בין השתיים?
    • שיטות צביעה לחיות תאים – יתרונות הצבענים המולקולריים הצובעים שיירים אמיניים. למה צביעה לחיות הינה חיונית בניסויים פונקציונליים (למשל בניסויים הבודקים שחרור ציטוקינים)
    • יצירה של ערוץ DUMP האוסף תאים מתים ותאים שאינם רצויים בניסוי
    • כמה תאים יש לאסוף?
    • שימוש ב- compensation beads ליצירת מטריצה של קומפנסציה
    • מה זה fluorescence spillover  וכיצד הקומפנסציה מתקנת אותו?
    • איך בונים מטריצת קומפנסציה אוטומטית ב-DIVA או ב- FLOWJO
    • איך מזהים קומפנסציה לקויה, ומה עושים על מנת לתקן אותה ידנית
    • מה זה Spreading error ומדוע הקומפנסציה לא מתקנת אותו?
    • מה זה טרנספורמציה בי-אקספוננציאלית וכיצד היא מסיעת בהצגה טובה יותר של התוצאות
    • שיטות למדידת כמות DNA ופרוליפרציה של התאים
    • שיטות למדידת שחרור ציטוקינים על ידי תאים – כיצד  להיזהר מארטיפקטים?
    • שימור/פיקסציה של התאים בתום הצביעה
    • טיפים לצביעה ולאנליזה נכונה של התאים
  • אנליזה ומטה-אנליזה של התוצאות
    • Hierarchical gating - כיצד מבצעים גייטינג נכון של דגימת ה-FACS?
    • Singlet gating
    • Live cell gating
    • Backgating
    • Cell subset gating
    • שימוש בביקורת ביולוגית, לעומת FMO, לעומת Isotype control
    • דוגמא מסכמת – ניתוח פוליפונקציונליות (polyfunctionality של תאי T)
    • סורטינג לתאים – עקרונות בסיסיים
    • מטה אנליזה בעזרת תוכנות ייעודיות
אודות המרצה

ד"ר אילן וולוביץ

ד"ר אילן וולוביץ הינו מומחה בתחום טכנולוגית ה FACS. הוא התמחה בציטומטריית זרימה ב -NIH Vaccine Research Center - אחד משני המרכזים המובילים בעולם בשימוש בציטומטריית זרימה.
לפרטים נוספים אנא לחצו כאן


קורסים נוספים של אותו המרצה
לומדים אצלנו